细胞外囊泡（Extracellular vesicles, EVs）由于携带母体细胞来源的蛋白、核酸、脂质及代谢物等物质，可通过介导不同细胞间的信息交流，参与许多病理、生理过程，包括肿瘤进展、免疫反应、神经系统疾病和心血管疾病等。因此，通过调控EVs的生成可有效调控EVs相关疾病的进展。虽然，已有大量的研究揭示了EVs生成的相关机制，但EVs生成调控的可能性仍处于实验研究阶段，尚未见相关的临床药物可用于靶向EVs生成，从而治疗EVs相关的疾病。EVs被效应细胞摄取，从而向效应细胞内传递相关“货物”，是其发挥功能的先决条件。因此，除了调节 EVs的生成外，还可以通过调节细胞对EVs的摄取影响EVs的功能。通过促进非效应细胞对EVs的摄取，加速细胞外环境中EVs的清除，从而抑制效应细胞对EVs的摄取，有望抑制或终止EVs的功能。

2024年3月27日，澳门·新葡萄新京6663蔡志坚教授/王建莉教授团队在国际胞外囊泡学会官方期刊Journal of Extracellular Vesicles杂志发表题为“Proton pump inhibitors enhance macropinocytosis-mediated extracellular vesicle endocytosis by inducing membrane v-ATPase assembly”的研究论文，揭示了质子泵抑制剂（Proton pump inhibitors，PPIs）通过调节细胞巨吞饮功能，控制细胞外环境中EVs的含量，从而影响EVs的功能及相关疾病的进展。

在筛选抑制细胞分泌EVs的药物时，团队研究人员发现PPIs可以明显减少细胞培养上清中EVs的含量。通过监测细胞对EVs的实时摄取（图1左）及EVs介导的Cre转移产生的细胞荧光转变（图1右），研究人员发现PPIs并不影响EVs的生成，却显著促进了细胞对EVs的摄取，从而导致EVs绝对产量的减少。

图1  PPIs促进细胞摄取EVs

通过深入的机制研究，研究人员发现，PPIs通过降低胞浆pH值，引起v-ATP酶ATP6V1A亚基从内体膜解离，并定位到质膜，促进质膜v-ATP酶的组装（图2），从而增强细胞的巨吞饮能力，加速细胞对EVs的摄取。

图2 PPIs促进内体ATP6V1A解离及质膜ATP6V1A招募

在此基础上，研究人员试图利用PPIs减少病理性EVs的含量，从而对EVs介导的相关疾病起到治疗作用。肿瘤细胞来源的EVs（Tumor cell-derived EVs, TEVs）可通过介导系统性免疫抑制促进肿瘤的进展。利用小动物活体荧光显微镜和活体成像（图3），研究人员发现PPIs可诱导肿瘤细胞对TEVs的再摄取，从而减少外周循环中的TEVs水平，激活抗肿瘤免疫，抑制肿瘤的进展。

图3  PPIs促进TEVs被肿瘤细胞再摄取

此外，PPIs可提高抗PD-1治疗的敏感性。抗PD-1治疗无效的乳腺癌和黑色素瘤肿瘤小鼠，在联合应用PPIs时，对抗PD-1治疗出现响应。相应的，对临床病人资料的回顾性分析发现，与单独抗PD-1治疗相比，PPIs的联合治疗可明显提高肿瘤病人的无进展生存期。

除参与各种病理、生理进程，EVs还是天然的药物递送载体。由于其天然的细胞来源，与传统的病毒载体相比EVs具有许多独特的优势。比如，EVs具有更的生物兼容性和更低的免疫原性、可穿越血脑屏障、在很大程度上可避免药物的体内降解等。通过促进效应细胞对荷载药物EVs的摄取，有望增强 EVs的递送效率，从而提高载药EVs对相关疾病的治疗效果。因此，PPIs很可能通过提高靶细胞对载药EVs的摄取，提高EVs的递送效率。在随后的研究中，研究人员对这一设想进行了验证。发现PPIs可增强荷载阿霉素和miRNA-155反义寡核苷酸EVs的递送效率，进而提高载药EVs对肿瘤和急性肝损伤的疗效。

综上所述，研究人员发现了PPIs作为一种潜在的调控EVs含量的药物，通过调控细胞对EVs的再摄取，影响EVs介导的功能。

澳门·新葡萄新京6663卢信良博士、浙江省肿瘤医院宋正波主任医师、澳门·新葡萄新京6663郝嘉悦博士和孔祥辉博士为本文的共同第一作者。澳门·新葡萄新京6663蔡志坚教授和王建莉教授为本文的共同通讯作者。